液相色谱仪的工作原理

更新时间：2019-09-06

液相色谱仪工作原理：高压泵将贮液罐的流动相经进样器送入色谱柱中，然后从检测器的出口流出，这时整个系统就被流动相充满。当欲分离样品从进样器进入时，流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离，分离后不同组分依先后顺序进入检测器，记录仪将进入检测器的信号记录下来，得到液相色谱图。
液相色谱仪法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送，色谱柱是以殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万），同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
一般在使用时注意：
1、在用紫外吸收检测器时，所用流动相应符合紫外分光光度法项下对溶剂的要求。
2、各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变。
3、一般色谱图约于20分钟内记录完毕，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。
4、如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。
5、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。
6、流动相应选用色谱试剂、高水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围。
7、水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。