聊聊普析紫外分光光度计的测量误差来源

　　1.参比溶液和溶剂的选择

　　分光光度计的测量实际上是以通过参比池的光强度作为入射光强度来测定试样的吸光度，先调节仪器使透过参比池溶液的吸光度为零，然后让同一束光通过样品，使得吸光度比较真实地反映待测物质的浓度，所以参比溶液的选择非常重要。如果仅有待测物质与显色剂的反应产物有吸收，可用溶剂或蒸馏水作参比溶液。如果显色剂有颜色，并在测定波长下有吸收，则用显色剂溶液作参比溶液，所加入显色剂及其它试剂的量，与试样中的加入量应一致。如果样品中其它组分本身的颜色对测定有干扰，而所用显色剂没颜色，则用不加显色剂的样品溶液作参比液。

　　2.测试波长的选择

　　当用普析紫外分光光度计对溶液进行测定时，先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸收曲线。在一般情况下，我们总是选择大吸收波长作为测量波长，这样可以提高灵敏度。而在有些情况下大吸收峰很尖锐、吸收过大或附近有干扰存在，就不能选大吸收波长，而必须在保证有一定灵敏度的情况下，选择吸收曲线中的其它波长进行测定，以消除干扰。绘制吸收曲线是正确选择波长的有效手段和方法。

　　3.吸光度范围的选择

　　试样在不同吸光度时，浓度的相对误差不同，一般选择0.2-0.8之间，浓度相对误差较小，可以通过改变吸收池厚度、检测波长或待测溶液浓度，使吸光度读数在适宜范围内。

　　4.狭缝宽度的选择

　　狭缝宽度不仅影响光谱的度，也影响吸光度值，在定量分析时，为了得到足够的测量信号，应采用较大狭缝。在定性分析时，为了提高分辨率，应采用较小狭缝，以获得精细的光谱结构。

　　5.吸收池的选择和使用

　　吸收池的规格应根据被测溶液颜色深浅来确定，一般是被测溶液颜色深时选光程短的，颜色浅时选光程长的，同一实验使用同一规格同一套吸收池。在定量测量之前需要对吸收池作校正和配对工作，吸收池不匹配时，对测量产生误差，吸收池方向不同，透光率亦有差异，使用时应注意方向。比色皿毛玻璃一面的上端有一个箭头，应与光路保持一致。另外，使用时，不要把溶液注得太满，以防在推动比色皿架时溶液溢出皿外。如透光壁外有溶液存在，要擦干再测，否则将产生误差。

　　6.温度的选定

　　温度对溶液颜色的深浅和吸光度都有影响，温度升高，紫外一可见光谱吸收向短波方向移动。故在绘制标准曲线和测定样品时，应保持温度一致，通常在室温条件下进行。

　　由于普析紫外分光光度计引起的测量总误差除来自仪器自身性能、测量条件外，还来自于分析过程的各个步骤，如试样处理、分离富集等，可能由于化学操作引起待测组分的损失和杂质的引入。所以出现不可接受的测量误差时要从多方面分析。